D2D Elisa 試劑盒工藝使用流程是你想的哪樣嗎？
點(diǎn)擊次數：778 更新時(shí)間：2022-09-21
D2D Elisa 試劑盒的樣品收集、處理及保存方法應用雙抗體夾心法測定標本水平。用純化抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入抗體，再與HRP標記的抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中呈正相關(guān)。用酶標儀在對應波長(cháng)下測定吸光度（OD值），通過(guò)標準曲線(xiàn)計算樣品濃度。
D2D Elisa 試劑盒工藝使用流程：
1. 標準品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑藴势芬恢?，用?hù)可按照規定在小試管中進(jìn)行稀釋。
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30后棄去，如此重復5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 再次溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
8. 再次洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30后棄去，如此重復5次，拍干。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時(shí)藍色立轉黃色）。
11. 測定：以空白空調零，450nm波長(cháng)依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以?xún)冗M(jìn)行。
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