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發(fā)光細菌法的測定方法

點(diǎn)擊次數:1314 更新時(shí)間:2016-01-25

1.生物測試法——發(fā)光細菌法

    利用污染物對革蘭氏陰性兼性厭氧微生物所發(fā)射出的藍綠光強度的影響,來(lái)判斷水質(zhì)受污染的情況。ELISA試劑盒

    發(fā)光細菌是一種非致病性的普通細菌,具有發(fā)光能力,正常條件下,經(jīng)培養后能發(fā)出肉眼可見(jiàn)綠色光.波長(cháng)490nm。凡是干擾或損害細菌呼吸或生理過(guò)程的任何因素都能使細菌的發(fā)光強度立即發(fā)生改變。并隨毒物濃度增加.發(fā)光強度減弱。

    這一特性可用于污水和地面水中污染物毒性的測定.具有較高的靈敏度和重現性,特別是測定綜合毒性。如重金屬、CN、酚類(lèi)化合物、抗生素等對其發(fā)光過(guò)程具有毒害作用。

發(fā)光細菌法的測定方法如下:

(1)新鮮發(fā)光細菌培養物測定法

    發(fā)光細菌液體在發(fā)光培養基中培養(至對數生),稀釋至適當濃度后,加入測試管中,再加入試液,作用10~20min后,讀出并記錄對照管和樣品管發(fā)光強度變化數據。

(2)發(fā)光細菌與海藻混合測定法

    利用有毒物質(zhì)對發(fā)光細菌沒(méi)有直接毒害作用,而對藻類(lèi)有毒害作用的特點(diǎn),把培養好的發(fā)光細菌懸浮液和培養好的藻類(lèi)懸浮液混合后加入測試管,光照一段時(shí)間后再測定發(fā)光強度的變化。因為毒物的作用使藻類(lèi)放氧能力下降,發(fā)光細菌發(fā)光能力也下降。ELISA試劑盒

(3)冷凍干燥發(fā)光細菌制劑測定法

    將已培養至對數生的發(fā)光細菌制成干燥粉劑,在冰箱中冷藏,使用時(shí)取出.加入重沖液保溫平衡10~15min,恢復到干燥前的生理狀態(tài)進(jìn)行試驗。

2.細菌學(xué)監測法

    在實(shí)際工作中,經(jīng)常以檢驗細菌總數,特別是檢驗作為糞便污染的指示細菌,如總大量菌群、糞大腸菌群、糞鏈球菌、腸道病毒等,來(lái)間接判斷水的衛生學(xué)質(zhì)量。

(1)水樣采集

   采集細菌學(xué)檢驗用水樣,必須嚴格按照無(wú)菌操作要求進(jìn)行;防止在運輸過(guò)程中被染,并應迅速進(jìn)行檢驗。一般從采樣到檢驗不宜超過(guò)2h;在10℃以下冷藏保存不得超過(guò)6h。

采集江、河、湖、庫等水樣,可將采樣瓶沉人水面下10~15cm處,瓶口朝水流上游方同.使水樣灌人瓶?jì)?。需要采集一定深度的水樣時(shí),用采水器采集。采集自來(lái)水樣,首先用酒精燈灼燒水滅菌或用70%的酒精消毒,然后放水3min.再采集約為采樣瓶容積翦80%的水量。

(2)細菌學(xué)監測法

水污染的細菌學(xué)監測指標有以下兩個(gè):

①細菌總數 細菌總數指lmI,水樣在營(yíng)養瓊脂培養基中,于37℃、24h培養后所生蘭的細菌菌落總數。它可反映水體微生物污染的程度,如每1mL自來(lái)水中細菌總數不礙超過(guò)10個(gè)(具體檢測方法見(jiàn)項目三)。

②大腸菌群數 大腸桿菌是一群需氧和兼性厭氧的、能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸、產(chǎn)氣的革蘭氏陰性無(wú)芽孢桿狀細菌。主要來(lái)源于人畜糞便中,在腸道中普遍存在并且是數量zui多的一種。故大腸桿菌群被當作監測水體是否受糞便污染的指標??偞竽c菌群是指那些能在3j℃、48h之內使乳糖發(fā)酵產(chǎn)酸、產(chǎn)氣.需氧及兼性厭氧的革蘭氏陰性的無(wú)芽孢桿菌,以每升水樣中所含有的大腸菌群的數目表示。大腸菌群數指每升水樣中含有的大腸菌群的數量。如每升飲用水中大腸菌群數不得超過(guò)3個(gè)。大腸菌群數量的測定:多管發(fā)酵法和濾膜法(具體檢測方法見(jiàn)項目四);ELISA試劑盒

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