乳腺組織培養

直接培養法：

  1．在含有少量培養液或Hanks液的容器中，用鋒利刀片將組織反復切割成碎塊。

  2．把組織碎塊連同液體注入離心管中，再補加少許培養液，用吸管吹打片刻， 
置試管架3～5分鐘。吸除上層液可排除非乳腺細胞部分。重復2～3次。

  3．末次處理結束后，向沉降管中再補加培養液，用吸管稍吹打，使沉降物重懸。 
不待細胞團塊下降立即通過(guò)3～4層無(wú)菌紗布濾入另管中。

  4．調整好適宜密度，接種入培養瓶中培養。

上皮細胞培養

表皮細胞培養

  1．取材：取外科植皮或手術(shù)殘余皮膚小塊，以角化層薄者為佳，早產(chǎn)流產(chǎn)兒皮 
膚更好，切成0.5～1平方厘米小塊。

  2．EDTA處理：先置入0.02％EDTA中室溫置5分鐘。

  3．冷消化：換入0.25％中，置4℃過(guò)夜。

  4．分離：取出皮膚，用血管鉗或鑷子把表皮與層分開(kāi)。

  5．溫消化：取出表皮單獨處理，用剪刀剪成更小的塊后，置入新的0.25％胰蛋 
白酶中，37℃再消化30～60分鐘。

  6．用吸管輕輕反復吹打，使成細胞懸液。

  7．培養液：通過(guò)80目不銹鋼紗網(wǎng)濾過(guò)后，低速離心，吸上清，直接加入Eagle 
液和20％小牛血清，制成細胞懸液，接種入碟皿中，CO溫箱培養。