細節決定成敗，這對于實(shí)驗室科研工作者來(lái)說(shuō)也是如此。在elisa試劑盒實(shí)驗中的各項操作細節有很多，如盡量少用排槍、勤換槍頭，加樣時(shí)由低濃度向高濃度加，因為這樣可以減少跳孔的幾率。而整個(gè)實(shí)驗的*后關(guān)鍵就是結果的處理方法了，那么在在今天的技術(shù)文章中，為您帶來(lái)的是ELISA試劑盒檢測結果分析方法。

①：ELISA實(shí)驗中樣品都要做復孔或三孔，然后計算每個(gè)濃度標準品的平均OD值，復孔的變異系數應該小于20%。

②：平均OD值減去空白孔的OD值。

③：制作標準曲線(xiàn)。

      以減去本底后的OD值為X軸，標準品的濃度為Y軸，利用作圖軟件得出一個(gè)合適的計算方法。建議使用合適的軟件來(lái)作圖，比如CurveExpert 1.4。這款軟件能夠給出很多種方法(比如直線(xiàn)、半對數、對數、四參數方程等)并從中選擇一條*合適的方程。要想檢驗某條曲線(xiàn)是否與表中數據吻合，可以將標準品的濃度作為未知數，將對應的OD值帶入該方程，計算出標準品的濃度，得到的結果應該與實(shí)際濃度很接近(+/-10%)。選擇擬合度的那條曲線(xiàn)。

       如果出現標準曲線(xiàn)的線(xiàn)性不好，或平行性不好(雙孔對照孔的OD值差別很大)，或出現跳孔的現象，可能引起的原因有酶標板孔間相互污染、洗板后未能盡快進(jìn)行下一步操作、添加樣品或其它試劑時(shí)操作的方法不對、孵育位置避光性不佳或蓋板膜沒(méi)有密封好使得水分蒸發(fā)、酶標板孔問(wèn)加入的試劑量不同，相對應的解決辦法是加樣時(shí)請小心勿將液體濺人另一孔中，人工洗板時(shí)也請小心，勿將洗滌液濺人另一微孔中、在洗板后及時(shí)進(jìn)行下一步操作、添加試劑時(shí)請懸空滴入，切記勿將槍頭接觸到板孔內，吸取不同試劑瓶中的液體時(shí)就要更換一次槍頭、確認孵育環(huán)境不透光，蓋板膜將酶標板密封好、使用已校正過(guò)的微量加樣器，如將次加入液體時(shí)槍頭上留有一滴的液體滴下，那么將以后槍頭上留有的液體也滴下，以保證加入液體體積的一致性。