ELISA實(shí)驗正面解析血清學(xué)反應的特點(diǎn)原理
ELISA試劑盒實(shí)驗正面解析血清學(xué)反應的特點(diǎn)
原理:
抗原和相應抗體之間在一定條件下可發(fā)生免疫學(xué)反應。在體外,抗體主要存在于血清中,因此抗原和抗體之間發(fā)生特異性結合的反應又稱(chēng)為血清學(xué)反應
(一)血清學(xué)反應的一般特點(diǎn)
1、抗原抗體的結合具有特異性
在血清學(xué)反應中,只有抗原(或抗體)和相應的抗體(或抗原)才能結合。
2、抗原抗體是分子表面的結合
抗原抗體發(fā)生結合后,復合物相當穩定,但是有可逆性。經(jīng)分離后重新得到的抗原或抗體的性質(zhì)仍不改變。
3、抗原抗體按一定的分子比例結合
只有在分子比例合適時(shí)才會(huì )出現可見(jiàn)反應。若兩者比例不合適,即抗體過(guò)?;蚩乖^(guò)剩,都不能形成大塊復合物,因而不能出現可見(jiàn)反應。在結合中,一般認為抗原是多價(jià)的,抗體是二價(jià)的。
4、抗原抗體反應分為兩個(gè)階段
*階段為抗原決定簇與抗體的結合部位發(fā)生特異性反應,形成復合物。這個(gè)階段具有特異性。其特點(diǎn)是反應快,數秒鐘至數分鐘內即可完成,但不被肉眼所見(jiàn)。
第二階段為抗原抗體反應的可見(jiàn)階段,是非特異性的。這一階段由于電解質(zhì)的作用,中和了抗原抗體復合物表面上的大部分電荷,使許多復合物能相互聚集成較大的顆粒而出現可見(jiàn)反應。這一階段反應較慢,常需數分鐘乃至十幾小時(shí)才能完成。受到電解質(zhì)、pH和溫度的影響。
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