注意事項：
1. 實(shí)驗操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時(shí)，要控制加樣速度，避免*孔與后一孔間的時(shí)間間隔過(guò)大，否則將會(huì )導致不同的預孵育時(shí)間，從而影響實(shí)驗的準確性以及重復性。
3. 孵育：嚴格按照說(shuō)明書(shū)上規定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應時(shí)間的控制：加入底物后請定時(shí)觀(guān)察反應孔的顏色變化，如果顏色較深，請提前加入終止液終止反應。
5. 建議實(shí)驗前預測樣品含量，如樣品濃度過(guò)高，應對樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)嬎憬Y果時(shí)乘以相應的稀釋倍數。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預實(shí)驗（即先做標準曲線(xiàn)，試用幾個(gè)標本），如果對本試劑盒有任何疑問(wèn)，可和所購經(jīng)銷(xiāo)商溝通，如果因運輸過(guò)程導致試劑盒失效，可要求調換，但概不承擔產(chǎn)品本身以外的任何損失。
安全性
1． 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2． 實(shí)驗中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
保存條件及有效期：
1.試劑盒保存：2-8℃
2.有效期：6個(gè)
原理:
采用雙抗體夾心法測定人雄激素結合蛋白（ABP）水平。用純化的人雄激素結合蛋白（ABP）抗體包被微孔板，制成固相載體，實(shí)驗時(shí)依次在微孔板中加入樣本及標準品，并加入 HRP 標記的 ABP 抗體，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，反復洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在過(guò)氧化物酶的催化下轉化為藍色，再用硫酸終止反應，轉變成黃色。顏色的深淺和樣品中的 ABP含量呈正相關(guān)。采用酶標儀在 450nm 波長(cháng)測定吸光度（OD 值），根據標準曲線(xiàn)，計算測試樣品中 ABP 濃度。 
實(shí)驗材料與試劑配制：
1. 儀器與材料：酶標儀（使用前預熱30分鐘），微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。
2. 緩沖液使用：加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中，如果樣品量不夠或者不確定，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可?；靹?，靜置1小時(shí)備用（如果標本是血清或者血漿，此步驟忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用。
樣品收集、處理及保存
1. 細胞培養上清：適用于檢測體外培養的細胞分泌性成份。用無(wú)菌管收集細胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2. 細胞：用PBS反復洗滌細胞3次，調整細胞濃度達到104
-106
/ml 左右，通過(guò)反復凍融，使細胞破壞并放出細胞內成份，或
者細胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。
3. 血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。
4. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
5. 體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6. 組織標本：切取組織標本，稱(chēng)取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標本勻漿，以2000-3000rmp離心20 分鐘，收集上清進(jìn)行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
8. 保存：如果樣品不能立即檢測，應將其分裝，-70 ℃保存，避免反復冷凍。保存過(guò)程中如出現沉淀，應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
操作步驟：
1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板，根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數，把剩余的板條繼續冷藏處理。分別設標準
品組（6 個(gè)濃度）、空白孔、待測樣品組。
注：為減少實(shí)驗誤差，保證準確性，建議設置復孔。
3. 加樣：依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中；空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水；其余微孔中加入 50ul
的待測樣本。
4. 加酶標溶液：標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液（空白對照孔除外）。
5. 溫育：酶標板用封板紙密封后，放入濕盒內于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿(mǎn)每孔，靜置 15-30s，充分清洗酶標板 5 次，用吸水紙*拍干。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液。
9. 讀板：在 450nm 波長(cháng)讀取各孔的 OD 值。
注：讀板時(shí)必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡，讀板時(shí)間控制在終止反應后的 30 分鐘內，以免影響準確性。