勞斯伴隨病毒PCR試劑盒實(shí)驗注意事項：
1．基礎程序；
2．擴增溫度和延伸溫度；
3．反應時(shí)間；
4．循環(huán)次數；
5．PCR 反應液的配制；
6．PCR技術(shù)的基本原理；
7．PCR的反應動(dòng)力學(xué)；
8．PCR擴增產(chǎn)物；
9．PCR反應體系與反應條件。

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以下是勞斯伴隨病毒PCR試劑盒實(shí)驗的詳細說(shuō)明書(shū)：

使用方法：
注：勞斯伴隨病毒PCR試劑盒實(shí)驗所有試劑使用前需*解凍，混合均勻，6,000rpm離心數秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關(guān)說(shuō)明書(shū)；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取，可直接使用。
2. 擴增試劑準備（PCR前準備區）
取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應管，每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應管)。
組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s，轉移至樣本處理區。
2.加樣（樣本處理區）
3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉移至擴增區。

以下是勞斯伴隨病毒PCR試劑盒實(shí)驗的相關(guān)產(chǎn)品，了解更多進(jìn)口PCR試劑盒點(diǎn)擊進(jìn)入。

 原代成纖維細胞培養特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml

CD38 Others Rabbit 兔 SCARB3 人細胞裂解液 (陽(yáng)性對照)

人APP基因轉染CHO細胞株;7WD10

HFL-I細胞，人胚肺成纖維細胞 鼠肌原細胞,C2C12細胞 T-105BIII型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL

SK-N-SH(人神經(jīng)母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2

HUVEC-c Growth Medium 2single donor 500,000cells 肺成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

MM, 小鼠小膠質(zhì)細胞 Mouse

非洲綠猴腎細胞系/IgR;VERO/IgR

大鼠星形膠質(zhì)細胞(RA)(5×105)

KM小鼠子瘤株;U14 小鼠腎小球內皮細胞*培養基 100mL

人胚肝二倍體細胞;CCC-HEL-1

RK1 Others Human 人 kA / RK1 人細胞裂解液 (陽(yáng)性對照)

胎兒表皮角化細胞*培養基   100mL

新生兒表皮角化細胞*培養基   100mL

表皮角化細胞*培養基   100mL

胎兒真皮成纖維細胞*培養基   100mL

小腸結腸炎耶爾森氏菌檢驗培養基  英文名稱(chēng)；    規格； 

CIN-1培養基基礎  英文名稱(chēng)；  Cepulodin Irgasan Novobiocin Agar  規格；  250g

改良Y培養基  英文名稱(chēng)；  Agar Y，Modified  規格；  250g

改良磷酸鹽緩沖液PSB  英文名稱(chēng)；  Phosphate Saline Buffer,Modified  規格；  250g

ITC肉湯  英文名稱(chēng)；  ITC Broth  規格；  250g

含225mlGN增菌液均質(zhì)袋  GN Enrichment Broth  10個(gè)/包

含100ml GN增菌液均質(zhì)袋  GN Enrichment Broth  10個(gè)/包

含225ml志賀氏菌増菌肉湯均質(zhì)袋  Shigella Enrichment Broth  10個(gè)/包

含225ml7.5%氯化鈉肉湯均質(zhì)袋  7.5% NaCl Broth  10個(gè)/包

含50ml 7.5%氯化鈉肉湯均質(zhì)袋  7.5% NaCl Broth  10個(gè)/包

勞斯伴隨病毒PCR試劑盒實(shí)驗MLCB寒天培地  用于沙門(mén)氏菌分離培養用途 : 用于沙門(mén)氏菌分離培養。用法稱(chēng)取本品 49.0g,加熱煮沸溶解于 1000ml 蒸餾水中,冷至 50-55℃時(shí),傾入無(wú)菌平皿,備用。

GN增菌液（10ml）  主要用于志賀氏菌的增菌培養，亦可用于沙門(mén)氏菌增菌培養（GB標準）主要用于志賀氏菌的增菌培養，亦可用于沙門(mén)氏菌增菌培養（GB標準）

H-頂層培養基  用于鼠傷寒沙門(mén)氏桿菌回復突變試驗（Ames試驗）用于鼠傷寒沙門(mén)氏桿菌回復突變試驗（Ames試驗）產(chǎn)品用法：稱(chēng)取本品11.0g，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，分裝試管，每支2.5ml，121℃高壓滅菌20min，備用。

低營(yíng)養V-B培養基（底層）  用于鼠傷寒沙門(mén)氏桿菌回復突變試驗（Ames試驗）用途:用于鼠傷寒沙門(mén)氏桿菌回復突變試驗(Ames試驗)。用法稱(chēng)取本品 50.7g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝三角瓶,115℃高壓滅菌 30分鐘,備用。

需要自備的器材：
1．勞斯伴隨病毒PCR試劑盒實(shí)驗儀器：分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn)：
1.即開(kāi)即用，用戶(hù)只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡(jiǎn)單，定量準確快速。
2. 引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化，特異性強。預期的 PCR 產(chǎn)物長(cháng)度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽(yáng)性對照，便于分析試驗結果。