綜合微生物的培養方法,包括以下步驟:
(1)前期準備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設備和材料;
(2)按比例配制培養材料;
(3)導入曝氣,進(jìn)行繁殖培養;
(4)取液觀(guān)察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養;
(5)分離并檢測;
(6)取液儲存;通過(guò)該綜合微生物培養方法簡(jiǎn)單可操作性強,培養的綜合微生物均在3代以?xún)?,菌?lèi)穩定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
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規格參數:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號 |
灰綠曲霉規格 | Aspergillu | EY-J964094 |
資源名稱(chēng): 灰綠曲霉
種屬: Aspergillus glaucus
提供形式: 凍干物
安全等級: 1
模式菌株: no
培養基: 綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然,121℃,15min。
生長(cháng)條件: 25-28℃,好氧,產(chǎn)綠孢子
存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(cháng)穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線(xiàn)菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養:
⒈ 孢子制備
⑴ 放線(xiàn)菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養基,培養基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養環(huán)境,不利于放線(xiàn)菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養可直接或間接誘導孢子形成。放線(xiàn)菌斜面的培養溫度大多數為28 ℃,少數為37 ℃,培養時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養,一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產(chǎn)品為培養基。這是由于這些農產(chǎn)品中的營(yíng)養成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類(lèi)培養基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養一般為25~28 ℃,培養時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jì)杉壟囵B,有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(cháng)。原則上各種營(yíng)養成分不宜過(guò)濃,子瓶培養基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養后形成大量的菌絲,這樣的種子稱(chēng)為一級種子,把一級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱(chēng)為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內,經(jīng)過(guò)培養形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱(chēng)為二級種子,將二級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱(chēng)為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱(chēng)為四級發(fā)酵。
FCG3B Polyclonal Antibody IgGFc片段低親和力受體Ⅲb抗體
FCG3A Polyclonal Antibody IgGFc片段低親和力受體Ⅲa抗體
IGFI Antibody,IGF1,IGF1,IGF 1,Insulin like growth factor1,Insulin like growth factor 1 IGFI抗體
IGFI Antibody,IGF1,IGF1,IGF 1,Insulin like growth factor1,Insulin like growth factor 1 IGFI抗體
IGFII Antibody,IGF2,IGF2,IGF 2,Insulin like growth factor2,Insulin like growth factor 2 IGFII抗體
IGFBP5 Antibody,IGFBP5,IGFBP5,IGFBP 5,IGFBP5,IGFBP 5 IGFBP5抗體
IGFBP5 Antibody IGFBP5抗體
IGFBP3 Antibody IGFBP3抗體
IGFBP1 Antibody IGFBP1抗體
IFNalpha 2a Antibody IFNalpha 2a抗體
LIPK 脂肪酶家庭成員K抗體 * 0.2ml Abscisic acid,SABA
NHEDC2 線(xiàn)粒體/氫交換蛋白質(zhì)2抗體 * 0.2ml Abscisic acid,SABA
NOC3L/FAD24 脂肪細胞分因子24 * 0.2ml PEPSIN
Sox9a 轉錄因子sox9a抗體 * 0.2ml Ribonuclease A from bovine pancreas
KBP KBP蛋白抗體 * 0.2ml Andarine
Nidogen 2 巢蛋白NID2抗體 * 0.2ml PEPSIN
Nanos3 骨巢蛋白抗體 * 0.2ml Proteinase K
PDE4A8 二酯酶4A8抗體 * 0.2ml Proteinase K
腫瘤壞死因子α(TNF-α)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
血管內皮細胞生長(cháng)因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)酶聯(lián)免疫試劑盒 Human VEGFR-2/Flk-1 ELISA kit
抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: ssDNA ELISA Kit
RatIerleukin4,IL-4酶聯(lián)免疫試劑盒白介素4(IL-4)酶聯(lián)免疫試劑盒規格:96T/48T
HumanGlathioneperoxidase,GSH-Px酶聯(lián)免疫試劑盒過(guò)氧化酶(GSH-Px)酶聯(lián)免疫試劑盒規格:96T/48T
HumanIschemiaModifiedAlbumin,IMAELISAKit缺血修飾白蛋白(IMA)酶聯(lián)免疫試劑盒規格:96T/48T
犬白介素4(IL-4)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊白介素1β(IL-1β)酶聯(lián)免疫試劑盒 Goat Ierleukin 1β,IL-1β ELISA Kit
繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(MIS/AMH)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: MIS/AMH ELISA Kit
RatAlpha-fetoprotein,AFP酶聯(lián)免疫試劑盒種胎兒球蛋白/胎蛋白(AFP)酶聯(lián)免疫試劑盒規格:96T/48T
Humancailageoligomericprotein,COMP酶聯(lián)免疫試劑盒軟骨寡聚蛋白(COMP)酶聯(lián)免疫試劑盒規格:96T/48T
Humandiamineoxidase,DAOELISAKit二氧化酶(DAO)酶聯(lián)免疫試劑盒規格:96T/48T
灰綠曲霉規格21號染色體開(kāi)放閱讀框56抗體Porcine CCL4L1 (Chemokine C-C-Motif Ligand 4 Like Protein 1) ELISA Kit
T淋巴細胞CD1抗體Porcine CD163 (Cluster of Differentiation 163) ELISA Kit
細胞角蛋白5抗體Porcine CDKN3 (Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 3) ELISA Kit
補體C9a抗體Porcine MSMβ (Microseminoprotein Beta) ELISA Kit
20號染色體開(kāi)放閱讀框141抗體Porcine PDGFRL (Plaet Derived Growth Factor Receptor Like Protein) ELISA Kit
20號染色體開(kāi)放閱讀框160抗體Porcine CENPA (Ceomere Protein A) ELISA Kit
親環(huán)蛋白(親環(huán)素)40抗體Porcine HELIX-Ⅱ(Type Ⅱ Collagen Helical Peptide) ELISA Kit
T細胞調控相關(guān)蛋白抗體Porcine PDCN (Podocin) ELISA Kit