葉綠體Elisa試劑盒顯色時(shí)用什么底物
葉綠體Elisa試劑盒陰性對照及陽(yáng)性對照:陰、陽(yáng)性對照若有正確的結果,對試劑盒操作的結果可以有粗略的判斷。
其實(shí)這個(gè)主要是看顯色的時(shí)候用的是什么底物了,OPD的話(huà)要避光,因為這種底物受光照后會(huì )自行變色,如果用TMB底物的話(huà),就沒(méi)這么嚴格了,ELISA試劑盒其他的步驟中像抗原綁定、洗滌之類(lèi)也都不用避光的,只有在做完二抗洗滌完上酶顯色底物的時(shí)候。因為大部分的底物對光敏感的,見(jiàn)光會(huì )分解,所以要求避光操作。
當顯色完成后(顯色時(shí)間是比較短的,需要預先摸索好)加入顯色終止液后溶液顏色會(huì )在幾個(gè)禮拜之內保持穩定,也不用再避光了。以減去本底后的OD值為X軸,標準品的濃度為Y軸,ELISA試劑盒利用作圖軟件得出一個(gè)合適的計算方法。建議使用合適的軟件來(lái)作圖,比如CurveExpert1.4。這款軟件能夠給出很多種方法(比如直線(xiàn)、半對數、對數、四參數方程等)并從中選擇一條zui合適的方程。要想檢驗某條曲線(xiàn)是否與表中數據吻合,可以將標準品的濃度作為未知數,將對應的OD值帶入該方程,計算出,得到的結果應該與實(shí)際濃度很接近(+/-10%)。選擇擬合度zui高的那條曲線(xiàn)。
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