黃體生成激素elisa kit必須標準化
黃體生成激素elisa kit在實(shí)驗條件(包括試劑)較難保證恒定的情況下,這種判斷法較為合適。在得出標本(S)和陰性對照(N)的A值后,計算S/N值。也有寫(xiě)作P/N的,這里的P不代表陽(yáng)性(positive),而是?。╬atient)的縮寫(xiě),不應誤解。為避免混淆,更宜用S/N表示。在早期的間接法ELISA試劑盒中,有些作者定出S/N為陽(yáng)性標準,現多為各種測定所沿用。
實(shí)際上每一測定系統應該用實(shí)驗求出各自的S/N的閾值。更應注意的是,N所代表的陰性對照是不含受檢物質(zhì)的人血清。有的試劑盒中所設陰性對照為不含蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)含量較底的緩沖液,以致反應后產(chǎn)生的本底可能較正常人血清的本底低得多。陽(yáng)性判定值(cut-off value)一般為陰性對照A值加上一個(gè)特定的常數,以此作為判斷結果陽(yáng)性或陰性的標準。ELISA試劑盒用此法判斷結果要求實(shí)驗條件十分恒定,陽(yáng)性和陰性的對照品應符合一定的規格,須配用精密的儀器,并嚴格按規定操作。陽(yáng)性判定值公式中的常數是在這特定的系統中通過(guò)對大量標本的實(shí)驗檢測而得到的。
現舉某種檢測HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復鈣人血漿,陽(yáng)性對照品HBsAg的含量標明為P=9±2ng/ml。每次試驗設2個(gè)陽(yáng)性對照和3個(gè)陰性對照。測得A值后,先計算陰性對照A值的平均數(NCX)和陽(yáng)性對照A值的平均數(PCX),兩個(gè)平均數的差(P-N)必須大于一個(gè)特定的數值(例0.400),試驗才有效。3個(gè)陰性對照A值均應≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而已另兩個(gè)陰性對照重新計算NCX;如有兩個(gè)陰性對照A值超出以上范圍,則該次實(shí)驗無(wú)效。
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