資源名稱(chēng): 銅綠假單胞菌
種屬: Pseudomonas aeruginosa (Schroeter) Migula
分離基物: Blood culture
提供形式: 定量菌片,西林瓶,2.0~2.5×10e3CFU/瓶
安全等級: 2
模式菌株: no
培養基: 營(yíng)養瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 20.0g,蒸餾水 1.0L,pH 7.0。121℃,15min滅菌。
生長(cháng)條件: 37℃,好氧
存儲條件: -20℃,避光冷藏。
規格參數:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號 |
銅綠假單胞菌規格 | Pseudomona | EY-J963242 |
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低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(cháng)穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線(xiàn)菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養:
⒈ 孢子制備
⑴ 放線(xiàn)菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養基,培養基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養環(huán)境,不利于放線(xiàn)菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養可直接或間接誘導孢子形成。放線(xiàn)菌斜面的培養溫度大多數為28 ℃,少數為37 ℃,培養時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養,一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產(chǎn)品為培養基。這是由于這些農產(chǎn)品中的營(yíng)養成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類(lèi)培養基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養一般為25~28 ℃,培養時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jì)杉壟囵B,有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(cháng)。原則上各種營(yíng)養成分不宜過(guò)濃,子瓶培養基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養后形成大量的菌絲,這樣的種子稱(chēng)為一級種子,把一級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱(chēng)為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內,經(jīng)過(guò)培養形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱(chēng)為二級種子,將二級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱(chēng)為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱(chēng)為四級發(fā)酵。
綜合微生物的培養方法,包括以下步驟:
(1)前期準備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設備和材料;
(2)按比例配制培養材料;
(3)導入曝氣,進(jìn)行繁殖培養;
(4)取液觀(guān)察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養;
(5)分離并檢測;
(6)取液儲存;通過(guò)該綜合微生物培養方法簡(jiǎn)單可操作性強,培養的綜合微生物均在3代以?xún)?,菌?lèi)穩定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
Neisseria gonorrhoeae 中文名稱(chēng):淋病奈瑟菌Neisseria gonorrhoeae提供形式:凍干安全等級:2模式菌株:yes應用領(lǐng)域:質(zhì)控菌株;BBL的質(zhì)控菌株;性傳播疾病的研究;Mediasting培養方法培養基:哥倫比亞血平板(成品)生長(cháng)條件:37℃,5%CO2,1-2天 純度:97%
Fusarium proliferatum 中文名稱(chēng):層出鐮刀菌(斜面)Fusarium proliferatum分離基物:小花棘豆植物組織。采集地:內蒙古阿拉善盟左旗哈提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領(lǐng)域:研究。發(fā)酵產(chǎn)生抗腫瘤活性藥物苦馬豆素(swainsonine)。其發(fā)酵產(chǎn)物乙酯性段擁有良好的抑菌活性。培養方法培養基:馬鈴薯、葡萄糖瓊脂培養基:(PDA):馬鈴薯提取液 1.0L,葡萄糖 20.0g,瓊脂 15.0g,pH自然。[注] 馬鈴薯提取液:取去皮馬鈴薯200g,切成小塊,加1.0L煮沸30min,濾去馬鈴薯塊,將濾液補足至1.0L。生長(cháng)條件:25℃,好氧。生長(cháng)特性菌落形態(tài):該菌在PDA培養基:上的平均生長(cháng)速度為7mm/d,12天長(cháng)滿(mǎn)整個(gè)平板。培養基:基質(zhì)反面為深黃色,菌落呈白色,蓬松凸起,棉絮狀,密集。菌絲顯微形態(tài)(400×):菌絲分隔清楚且多,直徑3-5μm,其分生孢子梗較直,頂端呈臘腸形,未見(jiàn)明顯孢子。發(fā)酵液中菌體形態(tài):菌液略渾濁,發(fā)酵液中菌絲為白色云霧狀,液面未見(jiàn)氣泡。產(chǎn)生真菌素抑制某些植物生長(cháng)。存儲條件:2-8℃。真空冷凍干燥法 純度:97%
Paecilomyces lilacinus 中文名稱(chēng):淡紫色擬青霉(斜面)Paecilomyces lilacinus提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領(lǐng)域:防治線(xiàn)蟲(chóng)的真菌。培養方法培養基:綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L ,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g, 硫胺素 微量,瓊脂15g ,pH 6生長(cháng)條件:25-28℃,好氧 純度:97%
Fusarium│proliferatum 中文名稱(chēng):層出鐮刀菌Fusarium│proliferatum分離基物:小花棘豆植物組織提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領(lǐng)域:發(fā)酵產(chǎn)生抗腫瘤活性藥物苦馬豆素(swainsonine)。其發(fā)酵產(chǎn)物乙酯性段擁有良好的抑菌活性。培養方法培養基:CM0014生長(cháng)條件:25℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:97%
Bifidobacrium longum subsp. infantis 中文名稱(chēng):長(cháng)雙歧桿菌嬰兒亞種Bifidobacrium longum subsp. infantis提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes培養方法培養基:改良MRS生長(cháng)條件:37℃,厭氧,其他培養基:都不長(cháng)存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:97%
Shigella sonnei 中文名稱(chēng):宋內氏志賀氏菌Shigella sonnei提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應用領(lǐng)域:研究、質(zhì)量控制,《GB 4789.5-2012志賀氏菌檢驗》陽(yáng)性對照菌株。培養方法培養基:營(yíng)養肉汁瓊脂:蛋白胨 10.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。121℃,15min。生長(cháng)條件:36℃,好氧存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:97%
Chromobacrium violaceum 中文名稱(chēng):紫桿菌(平板)Chromobacrium violaceum分離基物:淡,馬來(lái)西亞提供形式:90mm平板安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:營(yíng)養肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。生長(cháng)條件:37℃,好氧,24h,產(chǎn)紫色素 純度:97%
Candida glabrata 中文名稱(chēng):光滑假絲酵母Candida glabrata提供形式:凍干安全等級:1模式菌株:yes應用領(lǐng)域:模式菌株:。鑒定對照菌株。培養方法培養基:YM 培養基::酵母提取物,3.0 g 麥芽提取物,3.0 g 葡萄糖,10.0 g 蛋白棟,5.0 g 瓊脂,20.0 g 蒸餾1000 ml ,pH 6.2 +/- 0.2生長(cháng)條件:25℃,好氧 純度:97%
銅綠假單胞菌規格XLT4瓊脂黑色素細胞培養基-2(不含TPA)胰腺星狀細胞Endothelin-1 (ET-1) 內皮素-1(抗原)
MLCB瓊脂成纖維細胞培養基胰腺導管上皮細胞ERAB 內質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結合蛋白(抗原)
胰蛋白胨大豆肉湯(TSB)成纖維細胞培養基-2(用于心肌成纖維細胞)頜下腺上皮細胞ER-Alpha peptide 雌激素受體(多肽抗原)
胰蛋白胨大豆肉湯(TSB)肺泡上皮細胞培養基腮腺細胞TIMP-1(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-1) 金屬蛋白酶組織抑制因子-1(抗原)
10%胰蛋白胨大豆肉湯骨骼肌細胞培養基視網(wǎng)膜微血管內皮細胞ER-Alpha/ Beta Estrpgen Receptor Alpha/ Beta 雌激素受體(抗原)
Baird-Parker 瓊脂基礎上皮細胞培養基小梁網(wǎng)細胞ER- Beta (Estrogen receptor beta)peptide 雌激素受體(多肽抗原)
Baird-Parker 瓊脂基礎動(dòng)物上皮細胞培養基視網(wǎng)膜色素上皮細胞Aggrecan 軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原
亞碲鹽卵黃增菌液腎系膜細胞培養基視網(wǎng)膜muller細胞EXPB-2 植物延展素-β(抗原)