規格參數：

資源名稱(chēng): 褐球固氮菌

種屬: Azotobacter chroococcum

分離基物: 土壤

提供形式: 凍干物

安全等級: 1

模式菌株: no

應用領(lǐng)域: 研究；。固氮菌，細菌肥料。

培養基: 固氮培養基(Azotobacter Medium)：酵母提取物 0.5g， 20.0g，KH2PO4 0.2g，K2HPO4 0.8g，MgSO4.7H2O 0.2g，CaSO4·2H2O 0.1g，FeCl3 微量，Na2MoO4·2H2O 微量，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.2。

生長(cháng)條件: 25~28℃，好氧。

生長(cháng)特性: 卵圓形細胞，Gˉ ，常成對。周生鞭毛運動(dòng)，無(wú)芽孢。好氧，化能異養型。接觸酶陽(yáng)性。利用淀粉、。能利用鹽、氨和氨基酸作為氮源。在含一種有機碳源的無(wú)氮培養基中能固定分子氮。

存儲條件: 真空冷凍干燥法

?
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法，將瓊脂斜面孢子培養物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1～2個(gè)月，若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達3～4個(gè)月；②液氮超低溫保存法，將生長(cháng)穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中，密封于安瓿管內，然后控制冷卻速度，使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí)，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線(xiàn)菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物，都可用此法保存。
微生物菌種的培養：
⒈ 孢子制備
⑴ 放線(xiàn)菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養基，培養基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過(guò)0.5％)，碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養環(huán)境，不利于放線(xiàn)菌孢子的形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營(yíng)養可直接或間接誘導孢子形成。放線(xiàn)菌斜面的培養溫度大多數為28 ℃，少數為37 ℃，培養時(shí)間為5～14天。
⑵ 霉菌孢子的制備　
霉菌的孢子培養，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產(chǎn)品為培養基。這是由于這些農產(chǎn)品中的營(yíng)養成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類(lèi)培養基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養一般為25～28 ℃，培養時(shí)間為4～14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備　
搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶?jì)杉壟囵B，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長(cháng)。原則上各種營(yíng)養成分不宜過(guò)濃，子瓶培養基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養基配方。
⑵ 種子罐種子制備　
種子罐種子制備的工藝過(guò)程，因菌種不同而異，一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養后形成大量的菌絲，這樣的種子稱(chēng)為一級種子，把一級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵，稱(chēng)為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內，經(jīng)過(guò)培養形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱(chēng)為二級種子，將二級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵，稱(chēng)為三級發(fā)酵。同樣道理，使用三級種子的發(fā)酵，稱(chēng)為四級發(fā)酵。
Yarrowia│lipolytica 中文名稱(chēng)：解脂耶氏酵母Yarrowia│lipolytica提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領(lǐng)域:石油發(fā)酵制檸檬及異檸檬。培養方法培養基:CM0077生長(cháng)條件:28-30℃存儲條件:真空冷凍干燥法；定期移植法 純度：≥98%

Aspergillus│candidus 中文名稱(chēng)：白曲霉Aspergillus│candidus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領(lǐng)域:釀酒糖化菌。培養方法培養基:CM0076生長(cháng)條件:28-30℃存儲條件:真空冷凍干燥法；定期移植法 純度：98%

Monascus│anka 中文名稱(chēng)：紅曲紅曲菌Monascus│anka提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領(lǐng)域:紅色素。培養方法培養基:CM0085生長(cháng)條件:28-30℃存儲條件:真空冷凍干燥法；定期移植法 純度：98%

Lactobacillus│Coryniformis subsp. coryniformis 中文名稱(chēng)：棒狀乳桿菌棒狀亞種Lactobacillus│Coryniformis subsp. coryniformis分離基物:泡菜(蘿卜,豇豆,白菜,黃瓜)提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領(lǐng)域:泡菜、乳制品、果蔬制品等。培養方法培養基:CM0006生長(cháng)條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法；定期移植法 純度：99%

Lactobacillus│salivarius subsp. salicinuus 中文名稱(chēng)：唾液乳桿菌楊素亞種Lactobacillus│salivarius subsp. salicinuus分離基物:泡菜（蘿卜，木瓜）提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領(lǐng)域:發(fā)酵泡菜、果蔬制品、飼料等。培養方法培養基:CM0006生長(cháng)條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法；定期移植法 純度：99%

Lactobacillus│viridescens 中文名稱(chēng)：綠色乳桿菌Lactobacillus│viridescens分離基物:泡菜(木瓜,黃瓜,蘿卜,苦耳瓜)提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領(lǐng)域:發(fā)酵制泡菜、果蔬制品、飼料等。培養方法培養基:CM0006生長(cháng)條件:30~32℃存儲條件:真空冷凍干燥法；定期移植法 純度：99%

Propionibacrium│jensenii 中文名稱(chēng)：詹氏丙桿菌Propionibacrium│jensenii分離基物:窖泥提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領(lǐng)域:產(chǎn)丙,釀酒、降酯用。培養方法培養基:CM0286生長(cháng)條件:30℃存儲條件:真空冷凍干燥法；定期移植法 純度：98%

Saccharomyces│ellipsoideus 中文名稱(chēng)：橢圓酵母Saccharomyces│ellipsoideus提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領(lǐng)域:甘油。培養方法培養基:CM0077生長(cháng)條件:28℃存儲條件:真空冷凍干燥法；定期移植法 純度：1.00mg/ml
褐球固氮菌說(shuō)明書(shū)MR-VP培養基人表皮角質(zhì)細胞-新生原代上皮細胞培養特制添加劑AGEs cool article(advanced glycosylation end products cool article)  晚期糖基化終末產(chǎn)物蛋白對照品

察氏培養基人表皮角質(zhì)細胞-原代內皮細胞培養特制添加劑ET-1(Endothelin-1)  內皮素-1（蛋白多肽 活性蛋白）

結晶紫中性紅膽鹽瓊脂VRBA人表皮角質(zhì)細胞-胎兒原代平滑肌細胞培養特制添加劑GRGDS peptide  粘附多肽GRGDS

結晶紫中性紅膽鹽瓊脂人表皮黑色素細胞-淺色素原代成纖維細胞培養特制添加劑PACAP(1-38 Peptide)  腺苷環(huán)化酶激活肽 1-38（全蛋白）

產(chǎn)培養基人表皮黑色素細胞-中色素原代心肌細胞培養特制添加劑MBP(Myelin Basic Protein, MBP 68-86)  髓鞘性蛋白(多肽抗原)

西蒙氏枸櫞鹽瓊脂人表皮黑色素細胞-深色素原代表皮角化細胞培養特制添加劑Bursin  囊素三肽/三肽囊素/雞法氏囊三肽

腸道菌計數瓊脂（VRBDA)人表皮黑色素細胞-原代系膜細胞培養特制添加劑NPY ( Neuropeptide Y)1-36  神經(jīng)肽 Y（1-36多肽）

菌種保存培養基人表皮黑色素細胞-胎兒原代肝實(shí)質(zhì)細胞培養特制添加劑Leupeptin   亮抑酶肽
綜合微生物的培養方法，包括以下步驟：
（1）前期準備：（A）滅菌處理；（B）制備Biolite水；（C）檢查設備和材料；
（2）按比例配制培養材料；
（3）導入曝氣，進(jìn)行繁殖培養；
（4）取液觀(guān)察；（a）取液；（b）稀釋菌液；（c）平板培養；
（5）分離并檢測；
（6）取液儲存；通過(guò)該綜合微生物培養方法簡(jiǎn)單可操作性強，培養的綜合微生物均在3代以?xún)?，菌?lèi)穩定不發(fā)生突變，且繁殖快速。