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細胞名稱(chēng)  食管癌細胞；NEC
形態(tài)特性: 多角

生長(cháng)特性: 貼壁生長(cháng)

特征特性: 郭永軍等建系；亞硝胺（NMB2A）誘發(fā)人胎兒食管鱗癌第14代裸小鼠移植瘤組織小塊，培養3年，已傳40余代，上皮樣多邊細胞，貼壁生長(cháng)，裸小鼠移植成功。

培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

傳代方法: 1:3~1:6傳代；2~3天1次。

傳代情況: C3

凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 培養法（-）
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產(chǎn)品特點(diǎn):
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體，包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。
4、 采用溫和的中性裂解組分，保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩定劑，提取的蛋白穩定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時(shí)，背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA，與金屬螯和層析等兼容。 
培養操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時(shí)； 
4．將經(jīng)過(guò)計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中； 
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長(cháng)至覆蓋培養板底部2/3面積時(shí)，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。 
實(shí)驗要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕； 
4．如果需要更多生長(cháng)狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過(guò)大，以避免培養液的浪費和增加污染機率； 
5．如果細胞貼壁生長(cháng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 細胞的復蘇培養傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶?jì)?，?7℃、5％co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek－293細胞48h換液1次，細胞長(cháng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%消化1～2min，將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀(guān)察 在倒置顯微鏡下觀(guān)察并記錄細胞的生長(cháng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀(guān)察計數板四角大方格細胞數，按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液＝(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生的細胞，以0.25％消化成單細胞懸液，計數后分別接種于12個(gè)25cm2培養瓶中，每?jì)尚r(shí)隨機取出3瓶細胞，吸除培養基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ，計算貼壁率。
1.6 生長(cháng)曲線(xiàn) 取指數生的細胞用消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔，計數每孔細胞的數目并計算平均值。
雜交瘤細胞株；3B5形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣生長(cháng)特性: 懸浮生長(cháng)PE-CY5標記的兔抗豚鼠IgM

雜交瘤細胞株；NGAL-2D8形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣生長(cháng)特性: 懸浮生長(cháng)Anti-MPC2 Polyclonal Antibody

食管癌細胞；NEC兔抗糖蛋白抗體(GP)ELISA試劑盒ICAM-2ELISAKit產(chǎn)品規格:48T/96T。

兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒ICAM-2ELISAKit產(chǎn)品規格:48T/96T。

兔子B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒ICAM-2ELISAKit產(chǎn)品規格:48T/96T。

兔子高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA試劑盒ICAM-3ELISAKit產(chǎn)品規格:48T/96T。

兔主要組織相容性復合體Ⅰ類(lèi)(MHCⅠ/RLAⅠ)ELISA試劑盒ICAM-3ELISAKit產(chǎn)品規格:48T/96T。

兔子可溶性白細胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA試劑盒ICAM-3ELISAKit產(chǎn)品規格:48T/96T。

兔子基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒ICAM-3ELISAKit產(chǎn)品規格:48T/96T。

兔子補體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒ICAM-3ELISAKit產(chǎn)品規格:48T/96T。