產(chǎn)品特點(diǎn):
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩定劑,提取的蛋白穩定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時(shí),背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
細胞名稱(chēng) 乳腺癌細胞;BC-028
形態(tài)特性: 上皮樣細胞
生長(cháng)特性: 貼壁生長(cháng)
特征特性: BC-028乳腺癌細胞由中國人種乳腺癌組織經(jīng)培養選擇獲得,于2007年建立鑒定,是乳腺癌基礎研究和臨床研究的材料。
培養條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;50u/ml試劑胰島素
傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況: C9
凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性?
產(chǎn)品名稱(chēng) | 乳腺癌細胞;BC-028 |
生長(cháng)特性 | 貼壁生長(cháng) |
貨號 | EY-X63677 |
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現貨,超低比價(jià),產(chǎn)品名稱(chēng)貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。
實(shí)驗要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(cháng)狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過(guò)大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長(cháng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶?jì)?,?7℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長(cháng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀(guān)察 在倒置顯微鏡下觀(guān)察并記錄細胞的生長(cháng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀(guān)察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個(gè)25cm2培養瓶中,每?jì)尚r(shí)隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ,計算貼壁率。
1.6 生長(cháng)曲線(xiàn) 取指數生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。
培養操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長(cháng)至覆蓋培養板底部2/3面積時(shí),將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
Pterolactam
CAS No.:38072-88-7
中文名:
分子式:C5H9NO2
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IGF2R/M6PR/CD222/Mannose 6 Phosphate Receptor 胰島素樣生長(cháng)因子2受體抗體 現貨供應 0.1ml Amidopyrine/aminopyrine
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青石棉 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱(chēng):Asbestosacidwashed 含量:AR,99.8%
青鮮素鉀 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱(chēng):Maleichydrazidepotassiumsalt 含量:BR,98%
青鮮素 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱(chēng):MaleicHydrazide 含量:USP級,95%
輕質(zhì)碳鈣 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱(chēng):Calciumcarbonate 含量:CP,99%
輕質(zhì)碳鎂 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱(chēng):Magnesiumcarbonatehydroxide 含量:BR
氫桂皮 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱(chēng):3Phenylpropanoicacid 含量:AR,98.5%
氫麥芽糖 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱(chēng):Maltitol 含量:BR,冷水可溶
進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱(chēng):Hydroquinone 含量:ACS,99%
氫鎘 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱(chēng):Cadmiumhydroxide 含量:CP,72%
氫鉛 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱(chēng):Leadhydroxide 含量:LR,95%
人乳腺癌細胞;BC-028緩沖蛋白胨水(BPW)規格:250g用途:用于阪崎桿菌前增菌培養(GB標準)
哥倫比亞血瓊脂規格:用途:用于溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌的分離培養(GB4789.11-2014)
酪蛋白葡萄糖瓊脂規格:250g用途:用于霉菌、酵母菌等的分離培養
緩沖動(dòng)力-硝鹽培養基規格:250g用途:用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的動(dòng)力和硝鹽還原試驗
性肉湯規格:250g用途:用于性罐頭食品商業(yè)無(wú)菌檢驗
沙氏葡萄糖液體培養基規格:250g用途:用于真菌的培養