產(chǎn)品特點(diǎn):
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩定劑,提取的蛋白穩定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時(shí),背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
細胞名稱(chēng) 大額牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-1
形態(tài)特性: 成纖維細胞樣
生長(cháng)特性: 貼壁生長(cháng)
特征特性: 該細胞系來(lái)源于一雌性大額牛的耳部皮膚組織,2010年由中科院昆明細胞庫建立。
培養條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P2
凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法(-)?
產(chǎn)品名稱(chēng) | 大額牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-1 |
生長(cháng)特性 | 貼壁生長(cháng) |
貨號 | EY-X63886 |
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現貨,超低比價(jià),產(chǎn)品名稱(chēng)貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。
實(shí)驗要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(cháng)狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過(guò)大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長(cháng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶?jì)?,?7℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長(cháng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀(guān)察 在倒置顯微鏡下觀(guān)察并記錄細胞的生長(cháng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀(guān)察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個(gè)25cm2培養瓶中,每?jì)尚r(shí)隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ,計算貼壁率。
1.6 生長(cháng)曲線(xiàn) 取指數生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。
培養操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長(cháng)至覆蓋培養板底部2/3面積時(shí),將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
溶質(zhì)載體家族3成員2檢測試劑盒細胞名稱(chēng): 人胰腺癌細胞系;SW1990形態(tài)特性: 上皮樣;多角形Solute Carrier Family 3 Member 2
熱休克蛋白90β檢測試劑盒細胞名稱(chēng): 小鼠皮膚黑色素瘤細胞;B16-F10形態(tài)特性: 梭形,圓形Heat Shock Protein 90β
細胞骨架關(guān)聯(lián)蛋白4檢測試劑盒細胞名稱(chēng): 人肝癌細胞;Hep3B2.1-7形態(tài)特性: 上皮樣;多角形Cytoskeleton associated protein 4
B因子檢測試劑盒細胞名稱(chēng): 人臍靜脈細胞融合細胞;EA.hy926形態(tài)特性: 梭形factor B
H因子檢測試劑盒細胞名稱(chēng): 人肝母細胞瘤細胞;HuH-6形態(tài)特性: 上皮樣;多角形factor H
細胞間粘附分子2檢測試劑盒細胞名稱(chēng): 人非小細胞肺癌細胞;HCC827形態(tài)特性: 上皮樣;多角形ntercellular adhesion molecule 2
Cereblon蛋白檢測試劑盒細胞名稱(chēng): 小鼠顱蓋成纖維細胞;OP9形態(tài)特性: 成纖維樣Protein cereblon
肌動(dòng)蛋白結合蛋白檢測試劑盒細胞名稱(chēng): 人胃癌細胞;NCI-N87[N87]形態(tài)特性: 上皮樣actin binding protein
素受體1檢測試劑盒細胞名稱(chēng): 人胃腺癌細胞;AGS形態(tài)特性: 上皮樣Cannabinoid Receptor I
塵螨IgE檢測試劑盒細胞名稱(chēng): 人肺腺癌細胞;NCI-H1395形態(tài)特性: 上皮樣;多角形Der p1 IgE
纖維連接素相關(guān)抗原檢測試劑盒細胞名稱(chēng): 人喉癌細胞;LCC形態(tài)特性: 上皮樣fibronection related antigen
活化Ⅱa檢測試劑盒細胞名稱(chēng): 人胃癌細胞;MKN-28形態(tài)特性: 上皮樣activated coagulation factor Ⅱ
活化Ⅸa檢測試劑盒細胞名稱(chēng): 人內膜低分化腺癌細胞;EAG3形態(tài)特性: 上皮樣;多角形activated coagulation factor Ⅸ
紅細胞檢測試劑盒細胞名稱(chēng): 人結直腸腺癌細胞長(cháng)春新耐藥株;HCT-8/V形態(tài)特性: 上皮樣;多角形RBCS
層連蛋白α4檢測試劑盒細胞名稱(chēng): 小鼠肺成纖維樣細胞;C57/B6-L形態(tài)特性: 成纖維樣細胞laminin α4
性成纖維細胞生長(cháng)因子4檢測試劑盒細胞名稱(chēng): 小鼠皮膚成纖維樣細胞;C57/B6-S形態(tài)特性: 成纖維樣細胞basic fibroblast growth factor 4
citron激酶檢測試劑盒細胞名稱(chēng): 人內膜異位癥患者在位內膜間質(zhì)細胞永生化細胞;hEM15A形態(tài)特性: 梭形citron kinase
大額牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-1山梔苷甲酯64421-28-9英文名:Shanzhiside methylester
英文別名:Cyclopenta(C)pyran-4-carboxylic acid, 1-(beta-D-glucopyranosyloxy)-1,4A,5,6,7,7A-hexahydro-5,7-dihydroxy-7-methyl-, methyl ester, (1S-(1alpha,4aalpha,5alpha,7alpha,7aalpha))
CAS登錄號:64421-28-9
分子式:C17H26O11
分子量:406.38
分子結構:
外觀(guān):白色結晶
規格:20 mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實(shí)驗等。
提取來(lái)源:雙子葉植物唇形科*味 Lamiophlomis rotata (Benth.) Kudo. 的根及根狀莖或全草。
溶解性:易溶于水、和乙醇,難溶于,不溶于和。
熔點(diǎn):131-133℃
藥理藥效:活血化淤、 抗菌消炎、 增強免疫力。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年