產(chǎn)品特點(diǎn):
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩定劑,提取的蛋白穩定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時(shí),背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
細胞名稱(chēng) 大鼠纖維母細胞;1/EJ1-1
形態(tài)特性: 多形細胞樣
生長(cháng)特性: 貼壁生長(cháng)
特征特性: 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開(kāi)。
培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況: C10
凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性?
產(chǎn)品名稱(chēng) | 大鼠纖維母細胞;1/EJ1-1 |
生長(cháng)特性 | 貼壁生長(cháng) |
貨號 | EY-X63688 |
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實(shí)驗要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(cháng)狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過(guò)大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長(cháng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶?jì)?,?7℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長(cháng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀(guān)察 在倒置顯微鏡下觀(guān)察并記錄細胞的生長(cháng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀(guān)察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個(gè)25cm2培養瓶中,每?jì)尚r(shí)隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ,計算貼壁率。
1.6 生長(cháng)曲線(xiàn) 取指數生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。
培養操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長(cháng)至覆蓋培養板底部2/3面積時(shí),將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
Camptothecin
CAS No.:7689-03-4
中文名:喜樹(shù)
分子式:C20H16N2O4
小薊 訂購|咨詢(xún) 鐵氧還蛋白還原酶(FDXR) 規格: 1g
制何首烏 訂購|咨詢(xún) 鐵調素(Hepc) 規格: 3g
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Aggrecan1 軟骨蛋白聚糖抗體 現貨供應 0.1ml Phenformin hydrochloride
phosphoANAPC1 (Ser355) 細胞周期末期促進(jìn)復合蛋白APC1抗體 現貨供應 0.1ml Cefoperazone sodium
DAD1 細胞死亡防衛蛋白1抗體 現貨供應 0.2ml Cefoperazone sodium
TCERG1/CA150 轉錄延伸調節蛋白1抗體 現貨供應 0.1ml NBenzylglycine
CAB39L 鈣結合蛋白樣39抗體 現貨供應 0.2ml Zanamivir
Aggrecanase2/ADAMTS5 軟骨蛋白聚糖抗體 現貨供應 0.1ml Zanamivir
CAGE1/CT3/CT95 腫瘤/抗原3抗體 現貨供應 0.2ml Doxifluridine/5Fluoro5′deoxyuridine
CD66d/CEAM3 癌胚抗原相關(guān)細胞粘附分子3抗體 現貨供應 0.2ml Methazolamide
神經(jīng) 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱(chēng):Nervonicacid 含量:CP,98%
生根粉 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱(chēng):RootingPowde 含量:AR
失水甘露糖單油酯 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱(chēng):ArlacelA 含量:BR,97%
失水蘋(píng)果酐 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱(chēng):MA 含量:CP
濕 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱(chēng):HygromycinB 含量:II型,牛鼻膜
濕潤劑P0 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱(chēng):NP0 含量:BR,98%
十八鋇 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱(chēng):Bariumstearate 含量:BR,99%
十八鈣 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱(chēng):Calciumstearate 含量:AR,98.5%
十八鉀 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱(chēng):Potassiumstearate 含量:CP,98%
十八鋰 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱(chēng):Lithiumstearate 含量:FGC,400目
大鼠纖維母細胞;1/EJ1-1瓊脂培養基O規格:250g用途:用于金黃色葡萄球菌的選擇性分離培養,需添加亞碲鹽卵黃增菌液
肉湯培養基D規格:250g用途:用于沙門(mén)氏菌檢驗前增菌或大腸菌群檢測。
cary-blair運送培養基(液體)規格:10ml*20支用途:用于運送腸道致病菌標本
膽鹽硫乳瓊脂培養基(DHL)規格:250g用途:腸道菌選擇性培養基,特別是沙門(mén)氏菌的選擇性分離
細菌總數顯色培養基(不含瓊脂)規格:250g用途:用于食品和其他樣品中菌落總數計數
營(yíng)養肉湯規格:BR250g詳情介紹