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產(chǎn)品展示   ProductsATCC細胞>>轉化細胞>>皮膚成纖維細胞;CCC-HSF-1
 
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產(chǎn)品名稱(chēng):
皮膚成纖維細胞;CCC-HSF-1
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產(chǎn)品特點(diǎn):
皮膚成纖維細胞;CCC-HSF-1相關(guān)產(chǎn)品:探針?lè )晒舛?/br>Inhangapi病毒探針?lè )晒舛?/br>Feline Leukemia Virus(FeLV)貓白血病病毒探針?lè )晒舛?/br>Bovine Viral Diarrhea Virus (BVDV)牛病毒性腹瀉病毒探針?lè )晒舛?/td>
  皮膚成纖維細胞;CCC-HSF-1的詳細資料:

公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細介紹:

產(chǎn)品名稱(chēng)

生長(cháng)特性

貨號

皮膚成纖維細胞;CCC-HSF-1

貼壁生長(cháng)

EY-X63256

細胞名稱(chēng)  皮膚成纖維細胞;CCC-HSF-1
形態(tài)特性: 成纖維細胞樣

生長(cháng)特性: 貼壁生長(cháng)

特征特性: 取材自引產(chǎn)的15周胚胎組織,中國醫學(xué)科學(xué)院基礎醫學(xué)研究所細胞資源中心建立。

培養條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代;3~4天1次。

傳代情況: P5

凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 培養法(-)
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 
4.如果需要更多生長(cháng)狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過(guò)大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長(cháng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗報告:
一、分離與培養:
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實(shí)驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長(cháng)至80%融合時(shí),棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。
人惡性黑色素瘤細胞;A-375[A375]形態(tài)特性: 上皮細胞生長(cháng)特性: 貼壁生長(cháng)Canine (dog) BMP6 ELISA Kit

人肺腺癌細胞;Calu-3形態(tài)特性: 上皮細胞生長(cháng)特性: 貼壁生長(cháng)Sheep GLUT1/SLC2A1 ELISA Kit

人非小細胞肺癌細胞;NCI-H1299形態(tài)特性: 上皮細胞生長(cháng)特性: 貼壁生長(cháng) Feline IGF-2 ELISA Kit

人組織細胞淋巴瘤細胞;U937[U-937]形態(tài)特性: 單核細胞生長(cháng)特性: 懸浮生長(cháng)Human TARC ELISA KIT

人肺腺癌細胞;NCI-H1395形態(tài)特性: 上皮細胞樣生長(cháng)特性: 貼壁生長(cháng)Human JAML ELISA KIT

小鼠垂體瘤細胞(分泌促生長(cháng)激素分泌激素);AtT-20形態(tài)特性: 小的圓形細胞生長(cháng)特性: 懸浮生長(cháng)Rabbit MMP-3 ELISA Kit

小鼠黑色素瘤細胞;B16形態(tài)特性: 成纖維細胞樣生長(cháng)特性: 貼壁生長(cháng)Sheep Serpin A4/Kallistatin ELISA Kit

小鼠淋巴瘤細胞;EL4形態(tài)特性: 淋巴母細胞生長(cháng)特性: 懸浮生長(cháng)Feline CCL5/RANTES ELISA Kit

小鼠肺癌細胞;LLC形態(tài)特性: 其他生長(cháng)特性: 貼壁生長(cháng)Human RBP4 ELISA KIT

小鼠畸胎瘤細胞;F9形態(tài)特性: 上皮細胞生長(cháng)特性: 貼壁生長(cháng)Canine (dog) TLR2 ELISA Kit

小鼠網(wǎng)織細胞性白血病細胞;L615形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣生長(cháng)特性: 懸浮生長(cháng) Human IGFBP-6 ELISA KIT

小鼠骨髓瘤細胞;P3X63-Ag8形態(tài)特性: 淋巴母細胞生長(cháng)特性: 半貼壁生長(cháng)Human LAG-3 ELISA KIT

小鼠骨髓瘤細胞;P3X63-Ag8.653形態(tài)特性: 淋巴母細胞生長(cháng)特性: 半貼壁生長(cháng)Canine (dog) BMP4 ELISA Kit

小鼠肥大細胞瘤細胞;P815形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣生長(cháng)特性: 半貼壁生長(cháng)Rabbit Angiopoietin 1 (ANG1) ELISA Kit

小鼠淋巴瘤細胞;P388D1(IL-1)形態(tài)特性: 淋巴母細胞生長(cháng)特性: 懸浮生長(cháng)Goat IgG ELISA Kit

小鼠單核巨噬細胞白血病細胞;RAW264.7[RAW264.7]形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣生長(cháng)特性: 貼壁生長(cháng)Feline Apolipoprotein A-I ELISA Kit
皮膚成纖維細胞;CCC-HSF-1小鼠膠原酶II(CollagenaseII)ELISA試劑盒ASMAELISAKit產(chǎn)品規格:48T/96T。

小鼠硫氧化還原蛋白(Trx)ELISA試劑盒ASMAELISAKit產(chǎn)品規格:48T/96T。

小鼠硫氧還蛋白還原酶(TrxR)ELISA試劑盒ASMAELISAKit產(chǎn)品規格:48T/96T。

小鼠蛋白磷酶(PP)ELISA試劑盒ASMELISAKit產(chǎn)品規格:48T/96T。

小鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA試劑盒ASOELISAKit產(chǎn)品規格:48T/96T。

小鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒ASPELISAKit產(chǎn)品規格:48T/96T。

小鼠過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒ASPELISAKit產(chǎn)品規格:48T/96T。

小鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒ASTELISAKit產(chǎn)品規格:48T/96T。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀(guān)察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀(guān)察培養器皿底部發(fā)現細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現細胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實(shí)驗。
④如果發(fā)現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現細胞消化時(shí)間過(guò)長(cháng),未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實(shí)驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 皮膚成纖維細胞 CCC-HSF-1
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