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產(chǎn)品名稱(chēng) | 小鼠胰腺癌細胞(B類(lèi));Pan02 |
生長(cháng)特性 | 貼壁生長(cháng) |
貨號 | EY-X64078 |
細胞名稱(chēng) 小鼠胰腺癌細胞(B類(lèi));Pan02
形態(tài)特性: 多角
生長(cháng)特性: 貼壁生長(cháng)
特征特性:
培養條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)5%FBS
傳代方法: 1:4傳代,2~3天傳代一次。
傳代情況:
凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 培養法(-)
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產(chǎn)品特點(diǎn):
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩定劑,提取的蛋白穩定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時(shí),背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
培養操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長(cháng)至覆蓋培養板底部2/3面積時(shí),將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(cháng)狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過(guò)大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長(cháng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶?jì)?,?7℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長(cháng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀(guān)察 在倒置顯微鏡下觀(guān)察并記錄細胞的生長(cháng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀(guān)察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個(gè)25cm2培養瓶中,每?jì)尚r(shí)隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ,計算貼壁率。
1.6 生長(cháng)曲線(xiàn) 取指數生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。
肉脂酰轉移酶II檢測試劑盒生長(cháng)特性: 半貼壁生長(cháng)培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSCarnitine palmitoyltransferase II
亮氨酰tRNA合成酶檢測試劑盒生長(cháng)特性: 半貼壁生長(cháng)培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSleucyl-tRNA synthetase
鈉鉀協(xié)同轉運蛋白1檢測試劑盒生長(cháng)特性: 半貼壁生長(cháng)培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSNa-K-Cl Cotransporter 1
Ⅱa檢測試劑盒生長(cháng)特性: 半貼壁生長(cháng)培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBScoagulation factor Ⅱa
神經(jīng)絲輕鏈蛋白檢測試劑盒生長(cháng)特性: 貼壁生長(cháng)培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSneurofilament light
單純皰疹病I型IgG抗體檢測試劑盒生長(cháng)特性: 半貼壁生長(cháng)培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSherpes simplex virus I IgG
腫瘤壞死因子受體超家族成員6B檢測試劑盒生長(cháng)特性: 半貼壁生長(cháng)培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSTumor necrosis factor receptor superfamily member 6B
原前體蛋白檢測試劑盒生長(cháng)特性: 半貼壁生長(cháng)培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSProteins Induced by Vitamin K Absense of Antagonist
γ谷氨?;然笝z測試劑盒生長(cháng)特性: 半貼壁生長(cháng)培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSγ-glutamyl carboxylase
谷氨脫羧酶1檢測試劑盒生長(cháng)特性: 半貼壁生長(cháng)培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSglutamate decarboxylase1
谷氨脫羧酶2檢測試劑盒生長(cháng)特性: 半貼壁生長(cháng)培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSglutamate decarboxylase2
脂肪輔酶A連接酶檢測試劑盒生長(cháng)特性: 半貼壁生長(cháng)培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSfatty acid CoA ligase
硬脂酰輔酶A去飽和酶2檢測試劑盒生長(cháng)特性: 懸浮生長(cháng)培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSStearoyl-CoA desaturase 2
血小板膜糖蛋白纖維蛋白原受體檢測試劑盒生長(cháng)特性: 半貼壁生長(cháng)培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSglycoproteins IIb;IIIa fibrinogen receptor
可溶性血纖蛋白單體復合物檢測試劑盒生長(cháng)特性: 半貼壁生長(cháng)培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSsoluble fibrin monomer complex
Xa檢測試劑盒生長(cháng)特性: 半貼壁生長(cháng)培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBScoagulation factor Xa
Disabled同源物1檢測試劑盒生長(cháng)特性: 半貼壁生長(cháng)培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSDisabled Homolog 1
小鼠胰腺癌細胞(B類(lèi));Pan02E18444-66-1英文名:Cucurbitacin E
英文別名:α-Elaterin; α-Elaterine
CAS登錄號:18444-66-1
分子式:C32H44O8
分子量:556.69
分子結構:
外觀(guān):白色粉末
規格:20mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實(shí)驗等。
提取來(lái)源:葫蘆科甜瓜屬植物甜的果梗。
溶解性:易溶于
熔點(diǎn):235~237℃
藥理藥效:用于治療慢性肝炎。1細胞與抗癌作用,2抗肝損害,3提高機體免疫功能。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年